Slovakiens premiärminister Robert Fico uppger att hans land är redo att uppfylla sina åtaganden som Natomedlem, men att det är helt uteslutet att utländska militärbaser skulle kunna upprättas.
Han underströk att frågan är extra känslig med tanke på minnet av den sovjetiska invasionen av Tjeckoslovakien 1968.
– Jag kan inte föreställa mig att vi skulle ha utländska trupper på vårt territorium i form av baser, sade Fico i ett tv-framträdande enligt Reuters.
Utspelet kommer efter att Bohuslav Sobotka, premiärminister i grannlandet Tjeckien, tidigare i veckan gav ett liknande besked.
Initiativet till att öka Natos närvaro i Östeuropa kom från Barack Obama under ett tal i Polen i tisdags.
I april bad Polens försvarsminister Tomasz Siemoniak USA att stationera 10.000 trupper i hans land som ett skydd mot Ryssland. Även de baltiska länderna har tagit emot ett mindre antal amerikanska trupper de senaste månaderna.